By this author

OPTIMIZATION OF A549 CELL TRANSFECTION EFFICIENCY WITH A PLASMID ENCODINGTHE N-PROTEIN OF THE SARS- COV-2 VIRUS

Issue number 1 from 15.04.2025

Для тестирования новых противовирусных препаратов, направленных на деградацию нуклеокапсидного белка (N-белка) вируса SARS-CoV-2, желательно иметь клетки с экспрессией N-белка, для чего нужно найти условия для максимально достижимой эффективности трансфекции легочных клеток плазмидой, кодирующей этот белок. Для трансфекции использовали полиплексы, состоявшие из плазмиды, кодирующей N-белок, слитый с флуоресцентным белком mRuby3, и блок-сополимеров полиэтиленимин (ПЭИ)-полиэтиленгликоль (ПЭГ)-ТАТ пептид. Исследовали зависимость эффективности трансфекции клеток аденокарциномы легкого человека А549 от соотношений ПЭГ/ПЭИ и N/P (отношение азота в ПЭИ к фосфату в ДНК). Были показаны достоверные положительные корреляции между эффективностью трансфекции, определенной по данным проточной цитофлуориметрии, соотношением N/P и долей полиплексов, размером 40-54 нм. Полученные данные могут служить основой для создания животной модели, экспрессирующей N-белок вируса SARS-CoV-2 в легких.

44 0

MODULAR NANOTRANSPORTERS CONTAINING KEAP1 MONOBODIES ARE CAPABLE OF REDUCING THE TOXIC EFFECT OF ACETAMINOPHEN ON THE LIVER OF MICE

Issue number 1 from 15.04.2025

Ранее нами был создан модульный нанотранспортер (МНТ), содержащий монободи к Keap1 - внутриклеточному белку-ингибитору фактора транскрипции Nrf2, контролирующего защиту клеток от окислительного стресса, и способный в гепатоцитах взаимодействовать с Keap1 и защищать эти клетки от действия перекиси водорода. В качестве модели для исследования противотоксического действия данного МНТ использовали окислительное повреждение печени парацетамолом. Внутрибрюшинная инъекция мышам парацетамола приводила к повышению уровня аланинаминотрансфразы и аспартатаминотрансферазы в крови, а также к отеку печени. Значительное снижение уровня этих ферментов в крови, наряду с уменьшением отека печени, наблюдалось после предварительного внутривенного введения МНТ за 2 часа до инъекции парацетамола. Полученные результаты могут послужить основой для создания препаратов, направленных на лечение болезней, связанных с окислительным стрессом.

39 0

GALA3-containing modular nanotransporters are capable of delivering Keap1 monobody to target cells and inhibiting the formation of reactive oxygen species in the cells

Issue number 1 from 15.01.2025

В созданном ранее модульном нанотранспортере (МНТ), способном доставлять в цитозоль монободи к Keap1, транслокационный домен дифтерийного токсина (ДТокс) был заменен на эндосомолитический пептид GALA3. Установлено, что данная замена более чем вдвое увеличивает время жизни МНТ в крови. С помощью конфокальной микроскопии было показано, что МНТ с GALA3 интернализуется в клетки AML12 преимущественно за счет связывания с рецептором эпидермального фактора роста, а также способен выходить из эндосом в цитозоль. Используя клеточный анализ теплового сдвига, было показано, что МНТ с GALA3 и МНТ с ДТокс с одинаковой эффективностью способны нарушать образование комплекса Nrf2 с Keap1, что приводило к сходной защите клеток AML12 от действия перекиси водорода. Полученные результаты позволяют не только оптимизировать системное применение МНТ, но и могут послужить основой для создания средств, направленных на лечение болезней, связанных с окислительным стрессом.

40 0